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技術(shù)文章
Celltracker CM-DiI與DiI細(xì)胞熒光探針的標(biāo)記效果比較

CM-DiI(改良探針)與DiI(傳統(tǒng)探針)在透化和非透化處理樣本的效果比較:【來自文獻(xiàn)Staffend NA, et al. DiOlistic labeling of neurons in tissue slices: a qualitative and quantitative analysis of methodological variations.Front Neuroanat. 2011 Mar 1;5:14.】

1、未透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較

結(jié)果顯示【見圖1&圖2】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織的全細(xì)胞檢測(cè)顯示,不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對(duì)于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時(shí)間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對(duì)于DiI標(biāo)記的樹突段,不會(huì)時(shí)間段染色幾乎無(wú)差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強(qiáng)。

     

圖1(左). 非透化熒光染色組織的全細(xì)胞檢測(cè)。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);

圖2(右). 非透化熒光染色組織的樹突片段檢測(cè)。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);

 

2、透化組織DiI&CM-DiI標(biāo)記完整性的比較

結(jié)果顯示【見圖3&圖4】:兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片后即刻檢測(cè),不論是全細(xì)胞還是樹突段,結(jié)果都無(wú)明顯差異;兩種熒光探針(DiI和CM-DiI)標(biāo)記組織封片2周后檢測(cè),不論是全細(xì)胞還是樹突段,CM-DiI標(biāo)記的穩(wěn)定性在熒光信號(hào)、光淬滅和zui終圖片質(zhì)量上都強(qiáng)于DiI。

不管是即刻觀察,還是2周后觀察,染料完整性和圖片質(zhì)量都保持完整。對(duì)于樹突狀片段的結(jié)果染色結(jié)果一致。另外,通過分析樹突段的突棘密度來調(diào)查不同時(shí)間周期下染色穩(wěn)定性和完整性。對(duì)于DiI標(biāo)記的樹突段,不會(huì)時(shí)間段染色幾乎無(wú)差異。然而,CM-DiI標(biāo)記的樹突段,突棘密度封片2周后明顯增強(qiáng)。

   

圖3(左). 透化熒光染色組織的全細(xì)胞檢測(cè)。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);

圖4(右). 透化熒光染色組織的樹突片段檢測(cè)。A)DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);B)DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);C)CM-DiI標(biāo)記組織封片后馬上檢測(cè);D)CM-DiI標(biāo)記組織封片2周后熒光檢測(cè);

 

溫馨提示:對(duì)于不經(jīng)透化處理的樣本,只需用傳統(tǒng)的細(xì)胞膜熒光探針如DiI染色即可。對(duì)于后續(xù)需透化處理的樣本,推薦用改良探針如CM-DiI(貨號(hào):MX4007-50UG)進(jìn)行染色。

 

產(chǎn)品訂購(gòu)信息:【現(xiàn)貨提供,懋康生物整理和提供,*】

貨號(hào)                   

產(chǎn)品名稱                                                        

Ex/Em (nm)      

規(guī)格              

價(jià)格(元)      

MX4007-50UG

Celltracker CM-DiI 活細(xì)胞示蹤劑CM-DiI(紅色)

553/570

1×50μg

340.00

MX4007-250UG

Celltracker CM-DiI 活細(xì)胞示蹤劑CM-DiI(紅色)

553/570

5×50μg

1360.00

MX4002-10MG

DiI (橙紅色熒光探針)

549/565

10mg

398

 

細(xì)胞膜探針光譜和檢測(cè)濾片:

熒光探針               

 zui大激發(fā)/zui大發(fā)射波長(zhǎng)           

(Ex/Em)

濾光片編號(hào)

Omeaga公司                         

    Chroma公司                       

DiI

549/565nm

XF108, XF32

41002, 31002

CM-DiI

553/570nm

XF32

31002

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